PCR esperimentuak ere egiten ari gara, zergatik emaitzak beste batzuk baino askoz okerragoak dira beti?

PCR esperimentuak ere egiten ari gara, zergatik emaitzak beste batzuk baino askoz okerragoak dira beti?

Laborategian, begiratu besteen PCRa, anplifikazio eraginkortasuna handia da, elektroforesi banda ezin hobea da, eta begiratu bereari, denbora luzez egiten zaila da, sentitu erreakzioa oso ona dela, proba positibo faltsu baten emaitza ... arazoa?

Uste dut gure bazkide askok ere arazo ugari izan dituztela. PCR esperimentuetan pareta batekin topo egiten dugunean, inkontzienteki aztertuko ditugu erreakzio sistemaren faktoreak, baina askotan ez dugu aintzat hartzen esperimentuetan kontsumigarriek duten eragin garrantzitsua.

Zure PCR emaitza okerra da, PCR kontsumigarriak funtsezko arrazoia izan daitezke. Alde batetik, kontsumigarriak mikro kutsatzeak edo inhibitzaileak sartzeak kutsadura esperimentala eragingo du; Bestalde, kontsumigarriak gaizki hautatzeak emaitza esperimentalak ere sufrituko ditu.

Arazoa berriro dator. PCR kontsumitzaile mota ugari dago, beraz, nola aukeratu egokiak esperimentua leunagoa izan dadin? Zein dira zaindu beharreko arazoak? Lasai, gaurI urte askotako esperientziarekin konbinatuta, PCR kontsumigarriak hautatzeko ohiko arazoak ordenatuta, lagunduko zaituztelakoan nago.

 

1.G .: Zergatik egiten dira normalean PCR kontsumigarriak PP materialez?

Huida: PCR hornidurak erreaktiboekin edo laginekin kontaktu zuzena izaten dutenez, polipropilenozko (PP) materialak biologikoki inerteak dira, ez dira biomolekularrei atxikitzen eta tolerantzia kimiko ona eta tenperatura-tolerantzia ona dute (121ean autokonposatu daitezke) ° C, ziklo termikoan tenperatura-aldaketak ere jasan ditzake).

 

2.G .: Nola aukeratu behar dut PCR hodi / plaka tamaina desberdinen artean?

HUIDA: hautaketaren xedea: produktu egokiak hautatu eskakizun esperimental zehatzen arabera. PCR hodiaren tamaina gehienak PCR erreakzioaren baldintzak bete ditzake. Oinarri horretatik, lehen bolumen txikiko hodia aukeratzea gomendatzen da. Bolumen baxuko erreakzio hodiak / plakak gaineko espazio txikia duenez, beroaren eroankortasuna hobetzen da eta lurruntzea murrizten da. Aldi berean, lagin gehiegi edo gutxiegi gehitzea saihestu behar da. Gehiegi izateak eroankortasun termikoa, isurketa eta kutsadura gurutzatua gutxitzea ekar dezake, gutxiegi lagina lurruntzea gal daiteke.

Erreakzio-hodi arrunten zehaztapenak eta bolumenak:

Hodi bakarra / konbinatua: 0,5 ml, 0,2 ml, 0,15 ml

96 putzuko plaka: 0,2 ml, 0,15 ml

384 putzuko plaka: 0,04 ml

 

3.G .: Lagin kopurua txikia denean, hodi bakarra edo hodi konbinatua aukeratuko dut, baina zergatik dute batzuek estalki laua eta beste batzuek estalkia ganbila?

Huida: Lagin kantitatea txikia denean, hodi bakarra edo hodi konbinatua hobetsiko da. Hala ere, erreakzio bolumena handia denean, hodi bakarra da nagusi, eta bolumena 0,5 ml-ra iritsi daiteke. Estalki lauak eta estalki ganbilak abantaila dute, zehatz-mehatz honako informazio honetara jo dezakete.

Hodi bakarra: 0,2 ml eta 0,5 ml; Lagin kopurua malgutasunez aukeratu dezake.

Lotura hodia: 0,2 ml edo 0,15 ml aukerakoa da; 8 edo 12 hodi ohikoak dira.

Estalki laua: fluoreszentzia seinalearen transmisio zehatza eman dezake qPCRrako; Erraz idazteko markak.

Estalkia ganbila: PCR tresnaren estalkia beroarekin kontaktua presioak eragindako erreakzio-hodiaren deformazioa murrizteko; Hala ere, fluoreszentziaren seinalearen transmisioan eragingo du eta ezin zaio qPCR esperimentuari aplikatu.

 

4.G .: Zergatik dute PCR plaka batzuek gonak eta beste batzuek ez?

Huida: Izan ere, PCR plakaren gona automatizazio aplikazioetara hobeto egokitzeko diseinatuta dago, tresnari euskarri egonkorra eta erresistentzia mekanikoa eskainiz, baita pipetatze prozesuan egonkortasun handiagoa ere.

PCR plakak, orokorrean, ez hemline, half-hemline eta osoko hemline banatzen dira.

Gabe Plaka: egokia PCR makina edo qPCR makina gehienetarako, baina ez automatizazio aplikazioetarako. Egonkortasuna ez da altua pipetatze prozesuan, beraz, plakaren euskarriarekin erabili behar da.

Gona erdiko ertzeko plaka: etiketa edo barra kodeen aplikaziora eta aplikazio automatikoetara egokitu daiteke, eta pipeteen egonkortasun ona du.

Gona osoko ertzeko plaka: oso egokia aplikazio esperimental automatizatuetarako, barra kodearen etiketara eta aplikazioetara ere egokitu daiteke. Erresistentzia mekaniko ona du, puzteko modulu PCR tresnetan erabil daiteke eta egonkortasun handia du pipetatze prozesuan.

 

5.G :PCR plaketarako, zergatik ez dira izkinak eta etiketak berdinak?

Huida: Izkinaren ebaketaren eta markatzearen efektuaren araberakoa da.

Izkinako ebaketa: PCR plakaren izkinako ebakitzeko posizioa aukeratzea tresna egokiaren eskakizunen araberakoa da kokapen erraza lortzeko.

Identifikazioa: PCR plaketako markatzaile alfanumerikoek putzu indibidualak eta laginen kokapenak identifikatzen laguntzen dute. Orokorrean erliebatutako koloreko logotipo digitalerako edo grabatutako logotipoetarako. Aplikazio automatizatu batzuetarako, inprimatutako eta markatutako erreakzio plakak hobeto itxita daude.

 

6.G .: Zergatik daude PCR plaka batzuk ganbilak eta beste batzuk lauak? Zein da hobea?

Huida: egokitzen dena da onena. Bi PCR plaka komun daude: poro lauen marjina eta poro marjina altua.

Zulo lauko marjina erreakzio plaka, egokia PCR aparatu gehienetarako.

Goranzko orifizioak dituzten erreakzio plakek mintzaren zigilatzea errazten dute eta laginen arteko kutsadura gurutzatua izateko arriskua murrizten dute.

 

Huidak urte askotako esperientzia du PCR produktuak ekoizten eta prozesatzen eta industriako estandar altuetan. Produktuen lerroa aberatsa da eta PCR aplikazio esperimental gehienak asetzen ditu. Zatoz eta aukeratu produktu egokiak zure aplikazio esperimentaletarako.

谷歌推广疫情产品PCR


Mezuaren ordua: 21/03/2021